【NSC 23766】- 作用 - 生物活性 - 靶點活性

發布時間:2018-12-06 20:19:12 編輯作者:活性達人

NSC 23766三鹽酸鹽圖片

圖片:NSC 23766三鹽酸鹽結構式

NSC 23766,CAS號是1177865-17-6,是Rac GTP酶的抑制劑,靶向GEF的Rac活化(IC50:~50μM); 對密切相關的靶標RhoA或Cdc42沒有抑制作用。那么它的生物活性是什么?如何做實驗呢?下面讓小編給您詳細說明。

首先我們介紹NSC 23766的生物活性:

1)體外活性
NSC23766被確定為適合已知對GEF規范至關重要的Rac1表面凹槽。NSC23766以劑量依賴性方式有效抑制Rac特異性GEF Trio或Tiam1對Rac1的結合和活化,而不會干擾其相應的GEF或Rac1與BcrGAP或效應物PAK1相互作用的密切相關的Cdc42或RhoA結合或激活。[1] NSC 23766在調節細胞骨架上的Rac GTP酶功能和許多細胞功能方面具有活性,包括細胞周期,細胞生長,粘附,遷移和基因轉錄。

NSC 23766(50μM)有效阻斷血清或血小板衍生的生長因子誘導的Rac1激活和片狀偽足的形成,而不影響NIH 3T3細胞中內源性Cdc42或RhoA的活性。NSC 23766降低Trio或Tiam1但不降低Vav,Lbc,Intersectin或組成型活性Rac1突變體刺激的NIH 3T3細胞生長并抑制Trio,Tiam1或Ras誘導的細胞轉化。NSC23766劑量依賴性地抑制PC-3細胞增殖和不依賴貼壁的生長。25μMNSC23766通過Matrigel抑制PC-3細胞侵襲85%。[1]

50μMNSC23766抑制凝血酶誘導的人血小板中Rac1和Rac2的活化,以及血小板聚集。[2] NSC23766可預防swAPP-HEK293細胞中Aβ40和Aβ42的產生,而不影響Notch和sAPPα。NSC23766可防止細胞內γ-分泌酶活性,但不能作為直接γ-分泌酶抑制劑。NSC23766劑量依賴性地降低分泌的和細胞內Aβ40的水平,IC50為48.94μM。50μMNSC23766抑制Aβ42的釋放57.97%。[3] NSC23766調節內皮細胞一氧化氮合酶表達和內皮功能。100μMNSC23766在牛主動脈EC中抑制eNOS啟動子活性60%,在bEND.3細胞中抑制30%至35%。用NSC23766抑制Rac1使eNOS mRNA不穩定并將其半衰期縮短至17小時。NSC23766劑量依賴性地減弱ACh誘導的野生型小鼠主動脈環的松弛。[4]

NSC23766抑制細胞生長并誘導細胞凋亡。NSC23766以劑量依賴性方式降低MDA-MB-468和MDA-MB-231細胞活力,IC50為~10μM,這與雌激素受體(ER),孕酮受體(PR),Her2的狀態無關,和p53突變。NSC23766對MCF12A正常乳腺上皮細胞的存活幾乎沒有影響。暴露于NSC 23766 24小時后,MDA-MB-231細胞在G1期顯示從41%增加至65%,并且伴隨S和G2-M期的減少。100μMNSC23766誘導凋亡MDA-MB-468增加6倍。NSC23766對乳腺癌細胞中細胞周期停滯或凋亡的抑制是通過下調細胞周期蛋白D1,生存素和X連鎖的蛋白質凋亡抑制劑來介導的。[5]

2)體內活性
NSC23766誘導造血干細胞/祖細胞的動員。在“動員不良”的C57Bl / 6小鼠品系中腹膜內施用NSC23766(2.5mg / kg)導致注射后6小時循環的造血干細胞/祖細胞增加兩倍。[2] NSC23766減輕脂多糖誘導的小鼠急性肺損傷。用1或3mg / kg的NSC23766治療不僅可以減少炎癥細胞的浸潤和MPO活性,還可以抑制促炎介質,腫瘤壞死因子-α和白細胞介素-1β,mRNA的表達。NSC23766還可以減少LPS攻擊肺中伊文思藍和白蛋白的積累。[6]

我們已經了解了NSC 23766的生物活性,接下來如何做活性實驗呢?一般來說,有如下的三種方法:

1)細胞實驗
將細胞(1.5×10 4 / mL)接種在96孔組織培養板的每個孔中,用200μL培養基。鋪板24小時后,用200μL含有指定濃度的NSC23766的新鮮培養基替換培養基。在處理期結束時,向每個孔中加入20μLMTS溶液并在37℃下孵育2小時。在96孔板讀數器上讀取490nm處的吸光度。

2)動物實驗
Balb / c對照和NOD小鼠在7周齡時分成四組(n = 8 /組)。在8周齡時,兩組實驗動物(Balb / c和NOD)接受NSC23766(2.5mg / kg /天,ip /每天)和另外兩組,其作為對照Balb / c和NOD小鼠并且接受相等的體積的生理鹽水。每周監測體重和血糖,持續34周。

3)激酶實驗
在蛋白酶和磷酸酶抑制劑存在下將腰部增大的新鮮脊髓組織勻漿并用緩沖液裂解。在4℃下以12,000×g離心5分鐘后,收集上清液并與PAK-PBD珠子在4℃下在旋轉器上孵育1小時,然后通過以5000×g離心3小時沉淀珠子。最低溫度為4°C。將得到的沉淀重懸于LaemmLi緩沖液中并煮沸2分鐘。對珠子樣品進行Western印跡分析。每個樣品中的總Rac1也通過Western印跡分析確定。

今天介紹了NSC 23766的作用,并且詳細地說明了它的生物活性和實驗方法。綜上所述,NSC 23766是 Rac1 激活的抑制劑。它的靶點活性是Rac GTPase,50μM。

您可能想了解NSC 23766的物理化學性質https://www.chemsrc.com/cas/1177865-17-6_452613.html。如果您有其他資訊方面的需求,請和化源網聯系。

參考文獻:
1. Gao Y, et al. Proc Natl Acad Sci U S A, 2004, 101(20), 7618-7623.
2. Akbar H, et al. Methods Enzymol, 2006, 406, 554-565.
3. Désiré L, et al. J Biol Chem, 2005, 280(45), 37516-3
4. Sawada N, et al. Circ Res, 2008, 103(4), 360-368.
5. Yoshida T, et al. Mol Cancer Ther, 2010, 9(6), 1657-1668.
6. Yao HY, et al. Biochim Biophys Acta, 2011, 1810(7):666-674.

相關化合物:NSC 23766三鹽酸鹽

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