【BI 2536】- 作用 - 生物活性 - 靶點活性

發布時間:2018-12-05 22:08:09 編輯作者:活性達人

BI 2536圖片

圖片:BI 2536結構式

BI 2536是一種有效的Plk1抑制劑(IC50:0.83 nM)。它的選擇性比Plk2和Plk3高4倍和11倍。那么它的生物活性是什么?如何做實驗呢?下面讓小編給您詳細說明。

首先我們介紹BI 2536的生物活性:

1)體外活性
超過10倍濃度范圍從10nM開始,BI 2536使HeLa細胞以4N DNA含量積累,表明G2期或有絲分裂中的細胞周期阻滯。除了HeLa細胞,BI 2536還有效抑制一組32種人類癌細胞系的增殖,代表不同的器官來源(包括乳腺癌,結腸癌,肺癌,胰腺癌和前列腺癌,黑色素瘤和造血系統癌)腫瘤抑制因子或癌基因突變的模式(包括RB1,TP53,PTEN和KRAS狀態)。該細胞組中的半數最大有效濃度(EC 50)值范圍為2-25nM,而100nM BI 2536的濃度通常足以誘導完全有絲分裂停滯。指數生長的hTERT-RPE1,人臍靜脈內皮細胞(HUVECs)和正常大鼠腎(NRK)細胞的增殖在12-31 nM的EC50值下被阻斷,表明循環未轉化細胞對BI 2536的敏感性相當[3] 。

2)體內活性
BI 2536(40-50mg / kg,i.v。)阻斷免疫缺陷的nu / nu小鼠中人癌異種移植物的生長。靜脈內給予40-50mg / kg BI 2536的連續循環。每周一次或兩次被發現在多種異種移植模型中非常有效,例如具有完全腫瘤抑制的HCT 116結腸癌,每周兩次(治療對照(T / C)值0.3%)和T / C值為16%,每周一次治療; 根據臨床癥狀和沒有重大體重變化判斷,兩種方案都具有良好的耐受性[3]。

我們已經了解了BI 2536的生物活性,接下來如何做活性實驗呢?一般來說,有如下的三種方法:

1)細胞實驗
通過在各種濃度的BI 2536(10nM-1μM)存在下孵育72小時來進行細胞增殖測定,并通過在熒光分光光度計中測量Alamar Blue染料轉化來評估細胞生長。從劑量 - 反應曲線擬合外推細胞生長被抑制50%(EC50)的有效濃度[3]。

2)動物實驗
小鼠[3]-雌性BomTac:NMRI-Foxn1nu小鼠皮下注射HCT116結腸癌,NCI-H460或A549肺癌細胞,分別皮下注射2×106,1×106和1×107細胞到側腹每只老鼠。當腫瘤達到約50mm 3的體積時,將動物配對進入治療組和對照組,每組10只小鼠。在回歸實驗中,直到平均腫瘤體積達到500mm 3才開始治療。將BI 2536以指定的劑量和時間表靜脈內注射到尾靜脈中。給藥體積為每公斤體重10mL。用卡尺每周測定腫瘤體積三次。通過以下公式將結果轉換為腫瘤體積(mm 3):長×寬2×π/ 6。確定小鼠的體重作為同一天耐受性的指標。對于統計學分析,在單側(遞減)精確Wilcoxon檢驗中將治療組與媒介物對照組進行比較。

3)激酶實驗
Plk1,Plk2和Plk3的酶活性測定在連續稀釋的抑制劑(BI 2536)存在下進行,其中20ng重組激酶和10mg來自牛乳的酪蛋白作為底物。激酶反應最終體積為60 mL,在30°C下進行45分鐘(15 mM MgCl2,25 mM MOPS [pH 7.0],1 mM DTT,1%DMSO,7.5 mM ATP,0.3mCiγ-P33-ATP)。通過加入125mL冰冷的5%TCA終止反應。在將沉淀物轉移至多篩混合酯纖維素濾板后,用1%TCA洗滌板并用放射性法定量。劑量 - 反應曲線用于計算IC50值[3]。

今天介紹了BI 2536的作用,并且詳細地說明了它的生物活性和實驗方法。綜上所述,BI 2536是 PLK1 和 BRD4 的雙抑制劑,IC50 分別為0.83 和 25 nM。它的靶點活性是Met,4.754μM;PI3Kα,2.407μM;PLK1,0.83nM;PLK2,3.5nM;PLK3,9.0nM。

您可能想了解BI 2536的物理化學性質https://www.chemsrc.com/cas/755038-02-9_122800.html。如果您有其他資訊方面的需求,請和化源網聯系。

參考文獻:
[1]. Lénárt P, et al. The Small-Molecule Inhibitor BI 2536 Reveals Novel Insights into Mitotic Roles of Polo-like Kinase 1. Curr Biol. 2007 Feb 20;17(4):304-15.
[2]. Chen L, et al. BRD4 Structure-Activity Relationships of Dual PLK1 Kinase/BRD4 Bromodomain Inhibitor BI-2536. ACS Med Chem Lett. 2015 May 18;6(7):764-9.
[3]. Steegmaier M, et al. BI 2536, a Potent and Selective Inhibitor of Polo-like Kinase 1, Inhibits Tumor Growth In Vivo. Current Biology (2007), 17(4), 316-322.
[4]. Jeong SB, et al. Essential role of Polo-like kinase 1 (Plk1) oncogene in tumor growth and metastasis of tamoxifen-resistant breast cancer. Mol Cancer Ther. 2018 Apr;17(4):825-837.

相關化合物:BI 2536

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